一个蛋白是怎么诞生的?
1 研发组搞定序列设计,构建出合适的质粒
2 发酵组进行发酵。大概就是把质粒转进合适的表达体系,然后进行培养。常用的表达体系大概有大肠杆菌,毕赤酵母,CHO细胞等。大肠杆菌好养,表达量大,成本低,但是会富含内毒素。后两个难搞一点,但是理论上内毒素会很低。另外真核体系能够实现翻译后修饰。
研发级的发酵组一般用摇瓶,或者十升左右的反应器,大概和老式的大书桌差不多大。生产级就会用到非常大个的发酵罐了。一般从三十升到几百升都有,颇有蒸汽朋克感。真正的生产企业就是厂房了。
3 纯化。这里分为粗纯和精纯。就我的体验来看,这两者的分界好像不甚明确,更像是坐标轴上的左右移动。总之粗纯组会粗略地把细胞打碎,通过各种手段把蛋白初步分离,然后再把这部分液体进行一个初步的纯化,可能还要更换缓冲液或者浓缩。
精纯组则会对上述料液进行精纯(废话),用到的一般就是各种层析柱了。
4 制剂。 众所周知,蛋白质很容易坏。所以我们还需要一个组织对成品进行处理,并且把它们分装成容易储存和售卖的形式。这个组一般负责制剂筛选,也就是研究这个蛋白在什么里比较稳定,以及分装,冻干。
另外,在这个过程中自然伴随着无穷无尽的质检。因为他们无处不在,所以就不作为流程的一环了。神圣的QC大章鱼掌控着生产的每个流程,让我们祈祷今天的电泳条带清晰干净,内毒素检测低于1000吧。
到这里,我们就获得了一个基本可以拿出来卖的蛋白质产品。这玩意大概值多少钱呢?
1mg两万块吧,大概。